Analisis cairan serebrospinal (CSF) merupakan alat yang ampuh untuk meningkatkan deteksi berbagai proses yang terjadi dalam sistem saraf pusat, seperti pendarahan, peradangan, infeksi, tumor, dan kondisi klinis lainnya. Selain itu, evaluasi serial senyawa dalam CSF (seperti hormon, obat, neurotransmiter, biomarker, metabolit, dan virus) sama pentingnya dalam penelitian dasar dan translasi. Volume CSF dalam sistem saraf pusat dipertahankan tetap stabil melalui sekresi dan penyerapan.
I. Pertimbangan Operasional
CSF biasanya diambil melalui ventrikel serebral atau pungsi lumbal. Pungsi lumbal memiliki risiko komplikasi yang relatif lebih rendah pada primata nonmanusia karena, pada sebagian besar spesies, lokasi pungsi lumbal jauh dari ujung sumsum tulang belakang. Anestesi dan teknik aseptik yang tepat, termasuk persiapan lokasi seperti mencukur, dan penggunaan bahan steril, diperlukan. Setidaknya sarung tangan, spuit, dan jarum steril harus digunakan, dengan mempertimbangkan kain kasa bedah steril. Pengambilan CSF biasanya dilakukan dalam posisi berbaring miring, berbaring sternum, atau duduk, untuk meningkatkan akses ke ventrikel serebral atau memperbesar ruang intervertebralis melalui fleksi leher atau tulang belakang. Ukuran dan panjang jarum yang dipilih harus sesuai dengan spesies dan ukuran primata nonmanusia. Teknik, peralatan, bahan habis pakai yang digunakan selama prosedur, dan perawatan perioperatif bervariasi tergantung pada spesies, tujuan penelitian, dan preferensi dokter hewan klinis.
Beberapa protokol penelitian mungkin memerlukan pengumpulan CSF secara terus-menerus dari waktu ke waktu atau pengumpulan sampel CSF dari subjek yang tidak dibius. Untuk protokol ini, pengumpulan CSF secara terus-menerus dari monyet rhesus yang terjaga dapat dicapai melalui kateter CSF yang ditanamkan dalam jangka panjang dan dihubungkan ke port pengumpulan subkutan.
Penulis telah berupaya keras untuk menemukan referensi terbaru mengenai volume total CSF, batasan atau rekomendasi untuk tusukan dural, frekuensi pengambilan, volume penarikan yang aman, dan tingkat pengisian ulang CSF. Literatur tentang aspek ini terbatas untuk sebagian besar primata nonmanusia. Selain itu, metode pengambilan bervariasi, karena survei dari anggota Non-Human Primate Veterinary Association menunjukkan bahwa berbagai lembaga berhasil menggunakan metode yang berbeda untuk pengambilan CSF. Oleh karena itu, penulis memberikan pertimbangan dan rekomendasi untuk pengambilan CSF berdasarkan bukti terbaik yang ada.
Sebagai referensi, penelitian sebelumnya telah menetapkan bahwa volume CSF yang tampak pada monyet rhesus jantan dewasa (8,6 kg) adalah 3/4,6 mL, dengan laju aliran CSF 0,7/8,003 mL/menit. Laju pembentukan CSF pada monyet rhesus berkisar antara 28,11 μL/menit. Penelitian lebih lanjut pada primata nonmanusia diperlukan di area ini untuk memfasilitasi pengembangan rekomendasi yang lebih instruktif.
II. Potensi Reaksi yang Tidak Diinginkan
Meskipun komplikasi selama pengambilan CSF pada primata nonmanusia jarang terjadi, variasi anatomi dan metode teknis yang tidak tepat atau tidak memadai dapat menyebabkan kerusakan sampel atau komplikasi seperti pendarahan, herniasi, infeksi, kerusakan pada batang otak, sumsum tulang belakang, atau akar saraf, dan ketidaknyamanan pada hewan. Meskipun komplikasi ini jarang terjadi, namun dapat membahayakan kesejahteraan hewan.
Karena risiko yang terlibat, pengambilan CSF harus dilakukan oleh dokter hewan atau petugas veteriner yang terlatih. Untuk upaya pengambilan CSF yang tidak berhasil, praktiknya dapat bervariasi. Merupakan praktik umum untuk mengizinkan hingga tiga kali upaya yang tidak berhasil oleh satu orang. Setelah upaya ketiga yang tidak berhasil, orang lain yang berkualifikasi harus mengambil alih. Jika orang kedua tidak dapat mengambil CSF setelah tiga kali upaya, upaya tersebut harus dihentikan. Sementara itu, hewan akan menerima perawatan analgesik yang tepat dan pulih dari anestesi. Mengubah lokasi pengambilan (misalnya, dari ventrikel serebral ke lumbar) setelah upaya yang tidak berhasil sering kali menghasilkan keberhasilan. Jika upaya yang gagal tanpa panduan pencitraan terjadi, penempatan jarum dengan bantuan fluoroskopi dapat digunakan. Selain meningkatkan tingkat keberhasilan, panduan pencitraan juga dapat mengurangi tingkat tusukan traumatis.
Pemantauan pascaoperasi harus dilanjutkan hingga hewan kembali ke kandangnya dan dapat mempertahankan postur tegak tanpa dukungan. Pemantauan hewan harus berlangsung setidaknya 24 jam atau sesuai dengan protokol yang disetujui oleh Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC). Pemantauan harus mencakup penilaian parameter fisiologis, perilaku, dan lokomotor dasar. Tanda-tanda disfungsi neurologis, termasuk tetapi tidak terbatas pada kelesuan, depresi, koma, dan tanda-tanda menekan kepala, harus dinilai secara khusus. Sakit kepala dan hipotensi intrakranial berikutnya setelah pengumpulan LCS tidak jarang terjadi dalam pengobatan manusia. Mempertimbangkan potensi komplikasi ini pada primata non-manusia, pengobatan analgesik harus diberikan selama operasi dan dilanjutkan selama 2-3 hari pascaoperasi, atau sesuai kebutuhan berdasarkan pengamatan pascaoperasi terkait dengan perilaku yang terkait dengan sakit kepala atau nyeri tulang belakang. Regimen analgesik yang paling efektif mungkin melibatkan pengobatan komprehensif yang dimulai sebelum operasi.
III. Pertimbangan dan Pencatatan IACUC
IACUC harus memahami prosedur yang terkait dengan pengambilan LCS dan semua komplikasi yang mungkin terjadi serta meninjaunya setidaknya setiap tahun. Semua informasi yang relevan, seperti dosis obat, persiapan praoperasi, volume LCS yang diambil, frekuensi pengambilan, dan pemulihan pascaoperasi jangka pendek dan jangka panjang, harus dijelaskan dalam protokol IACUC dan didokumentasikan dengan tepat dalam catatan medis atau catatan laboratorium.
Meskipun CSF mungkin merupakan data penting dalam protokol penelitian, teknik pengumpulan yang tidak tepat dapat memengaruhi kesejahteraan hewan. Saat mengajukan protokol, justifikasi ilmiah untuk jumlah dan frekuensi pengumpulan harus diberikan. Secara khusus, IACUC harus mengevaluasi dengan cermat setiap proposal yang melibatkan pengumpulan CSF dan mempertimbangkan hal-hal berikut:
1.Apakah pengumpulan CSF penting untuk mencapai tujuan ilmiah yang diuraikan dalam protokol?
2. Apakah ada metode alternatif dan metode evaluasi sistem saraf pusat yang kurang invasif (seperti teknik pencitraan) yang tersedia, dan jika ada, apakah metode tersebut telah dipertimbangkan?
3. Apakah operator telah menerima pelatihan yang tepat dan memiliki keterampilan yang memadai?
4. Apakah anestesi perioperatif dan regimen analgesik yang tepat akan diberikan? Konsultasi dengan dokter hewan laboratorium harus dilakukan terkait rencana anestesi dan analgesik.
5.Apakah volume CSF yang dikumpulkan mempertimbangkan usia dan ukuran hewan?
6. Apakah jumlah dan frekuensi tusukan dural sesuai untuk hewan tersebut, dan apakah risiko komplikasi telah diminimalkan? Jika beberapa pengambilan LCS merupakan bagian dari penelitian, waktu pengambilan maksimum untuk setiap hewan harus ditentukan.
7.Apakah rencana pemantauan pascaoperasi sudah tepat?
8. Apakah semua kemungkinan komplikasi pascaoperasi telah dipertimbangkan, dan apakah semua intervensi yang wajar, termasuk eutanasia, telah didaftarkan?
