Pengujian imunogenisitaspenting dalam pengembangan obat klinis, terutama untuk produk bioterapi. Meskipun regulasi berfokus pada persyaratan klinis, penilaian imunogenisitas nonklinis tetap penting dalam keadaan tertentu. Menurut ICH S6, imunogenisitas nonklinis harus dievaluasi ketika ada perubahan aktivitas farmakodinamik yang signifikan atau ketika paparan obat berubah tanpa penanda farmakodinamik atau indikator respons yang dimediasi imun.
Konsensus Strategi Minimum oleh Forum Bioanalisis Eropa (EBF)
EBF membentuk kelompok kerja pada tahun 2016, yang menghasilkan konsensus mengenai strategi minimal untuk evaluasi imunogenisitas nonklinis. Parameter utama meliputi evaluasi SCP, sensitivitas, toleransi obat, dan presisi:
1. Nilai Batas:Untuk ambang batas penyaringan, Tingkat Positif Palsu (FPR) sebesar {{0}}.1-1% direkomendasikan tanpa pengujian konfirmasi. FPR 0,1% membantu menyingkirkan positif palsu di dekat sinyal SCP, yang secara efektif mendeteksi respons imun nonklinis yang relevan. Dengan mematuhi prinsip 3R, SCP dapat ditentukan menggunakan sampel individual yang lebih sedikit, idealnya 15-30, yang menghasilkan 60 titik data (misalnya, 30 sampel dianalisis dua kali atau 15 sampel dianalisis empat kali). Konfirmasi FPR sampel pra-dosis tidak diperlukan karena relevansi nonklinisnya yang terbatas.
2. Sensitivitas:Sensitivitas harus dinilai dalam satu batch analisis. MRD idealnya harus di bawah 100, dengan sensitivitas di bawah 1000 ng/mL. Menurut pedoman NMPA 2021, sensitivitas harus mencapai 250-500 ng/mL, dengan sensitivitas di bawah -100 ng/mL lebih disukai jika dapat dicapai. Konsentrasi LPC dapat ditetapkan mendekati 2-3 kali sinyal SCP tanpa analisis statistik yang ekstensif.
3. Presisi:Presisi harus dievaluasi pada tiga kelompok analisis, masing-masing mencakup enam set kontrol positif yang disiapkan secara independen pada tiga tingkat konsentrasi (HPC, MPC, LPC) dan enam set kontrol negatif (NC).
4. Tingkat Toleransi Obat:Toleransi obat harus dievaluasi pada kadar LPC (atau kontrol positif 1000 ng/mL), memastikan metode dapat mendeteksi ADA pada kadar obat yang diharapkan dalam studi nonklinis.
Parameter validasi opsional meliputi selektivitas, spesifisitas, titer, dan stabilitas, yang disesuaikan dengan kebutuhan proyek masing-masing.
Mengatasi Tantangan Industri
"Strategi minimum" menghadapi tantangan implementasi praktis, terutama karena ketergantungan industri yang sudah lama pada panduan klinis untuk studi imunogenisitas nonklinis. Misalnya, industri sering ragu untuk mengadopsi strategi seperti "menyaring hanya dengan 0.1-1% FPR tanpa uji konfirmasi." Meskipun demikian, mendefinisikan nilai batas, sensitivitas, toleransi obat, dan presisi tetap penting.
Rekomendasi untuk Uji Imunogenisitas Nonklinis
Mengingat kurangnya kemampuan menerjemahkan antara data nonklinis dan klinis, EBF menyarankan hal berikut:
1. Penilaian Kasus per Kasus:Penilaian antibodi antiobat nonklinis (ADA) harus didasarkan pada alasan ilmiah dan kegunaan data, bukan menjadi persyaratan default.
2. Studi Farmakokinetik/Farmakodinamik (PK/PD):Studi-studi ini, yang dilakukan sebelum toksikologi GLP, dapat memberikan wawasan tentang respons imun tetapi nilainya terbatas.
3. Studi Toksikologi:Sasaran utamanya adalah untuk menunjukkan paparan yang cukup dan menilai patologi yang dihasilkan serta reversibilitasnya, dengan menentukan tingkat tanpa efek dan batas keamanan untuk penggunaan klinis. ADA mungkin atau mungkin tidak memengaruhi TK/PD atau menyebabkan patologi yang diamati.
4. Pengambilan Keputusan:Kemungkinan menghasilkan respons imun in vivo harus memandu aktivitas pengembangan pengujian, menyeimbangkan risiko bisnis, dan jadwal sponsor.
Pendekatan Strategi Imunogenisitas:
- Simpan sampel dan kembangkan/validasi pengujian hanya jika TK/PD dan dampak keselamatan teramati.
- Mengembangkan pengujian dan memulai validasi/pengujian atas dampak yang diamati pada TK/PD dan keselamatan.
- Secara proaktif mengembangkan dan memvalidasi pengujian berdasarkan risiko dan sumber daya bisnis.
Pendekatan yang ramping dapat diambil untuk validasi pengujian, menghindari persyaratan penuh pengujian klinis dan menerapkan prinsip 3R. Pengujian penyaringan dengan titik potong yang ketat (0.1-1% FPR) atau pendekatan sinyal/gangguan dapat mencukupi untuk analisis sampel.
Dengan mengadopsi strategi yang dioptimalkan ini, evaluasi imunogenisitas nonklinis dapat menjadi lebih efisien dan selaras dengan harapan ilmiah dan peraturan, yang pada akhirnya meningkatkan pengembangan produk bioterapi.
Kata Kunci:
Pengujian imunogenisitas
Imunogenisitas nonklinis
Antibodi anti-obat (ADA)
Farmakokinetik (PK)
Farmakodinamik (PD)
Toksikologi
Kepekaan
Presisi
Forum Bioanalisis Eropa (EBF)
Pedoman ICH S6
